紫外分光光度法优缺点

紫外分光光度法优缺点

紫外分光光度法优缺点学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理和实验技术。掌握-紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。二、实验原理、本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其吸收峰位于附近(不同的蛋白质吸收波长略有差别)。在吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液的浓度的关系服从朗伯-比耳定律。紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收波长范围内的吸收光谱,是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。紫外-可见吸收光谱的产生是由于分子的外层价电子跃迁的结果,其吸收光谱为分子光谱,是带光谱。紫外-可见分光光度法所采用的仪器称为分光光度计,它的主要部件有五个部分组成,如下所示:单色器吸收池检测器信号显示器由光源发出的复合光经过单色器分光后即可获得任一所需波长的平行单色光,该单色光通过样品池对样。

紫外分光光度法优缺点、学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理。掌握用紫外分光光度计测定蛋白质含量的实验技术并了解此仪器的主要构造。二、实验原理蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外光的性质,其吸收峰位于附近。在吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液浓度的关系服从朗伯比尔定律:为溶液的吸光度值,为石英比色池的厚度,为蛋白质溶液的浓度。三、实验仪器与试剂-双光束紫外可见分光光度计;标准蛋白质溶液:.溶液;待测蛋白质溶液;比色管(只);吸量管;吸耳球;胶头滴管;滤纸;烧杯。四、仪器装置图以及光路框图在工作界面上选择测量项目(光谱扫描,光度测量),本实验选择光度测量,设置测量条件(测量波长等)。将空白放入测量池中,点击扫描空白,点击校零。六、实验步骤吸收曲线的绘制用吸量管吸取标准蛋白质溶液于比色管中,用.溶液稀释至刻度,摇匀。用石英比色皿,以.溶液为参比,在区间,每隔测量一次吸光度,记录读数,从吸收。

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